杨树花叶病毒病

杨树花叶病毒病（ Poplar Mosaic Virus (PMV)）
异  名： Canadian Poplar Mosaic Virus
分类地位： 香石竹潜隐病毒组Carnation Latent Virus
寄  主： 美洲黑杨、念珠杨、黑杨、莱比锡杨、健杨、I-214杨、I-262杨、沙兰杨、毛果杨等。接种寄主：心叶烟、三生烟、麦格隆熄丰烟、烟草、曼陀罗、辣椒、黄瓜、碧冬茄等植物 。

经济重要性

杨树花叶病毒病是一种世界性病害，发病后很难防治。病叶较正常叶短1/2，且氮、磷、钾含量明显降低。幼苗高、粗生长受阻，幼树生长量至少降低30％。严重发病的植株木材比重和强度降低，木材结构也发生异常。近年来随着国外杨树品种的不断引进和推广，我国局部地区已有该病发生。
我国曾从意大利引进的I-63/51、I-69/51、I-72/58和加龙等杨树品种上发现带有花叶病毒。

传播途径

该病主要是靠杨树无性繁殖或嫁接侵染传播，摩擦汁液接种也能使一些杨树发病。

分布

国内：北京市、江苏、山东、河南、甘肃、四川、青海、陕西、湖南；
国外：保加利亚、西班牙、前南斯拉夫、荷兰、比利时、意大利、丹麦、捷克、波兰、法国、瑞士、加拿大、美国、日本、印度。

危害及症状

该病初期于6月上、中旬在有病植株下部叶片上出现点状褪绿，常聚集为不规则少量橘黄色斑点，至9月份，从下部到中上部叶片呈明显症状：边缘褪色发焦，沿叶脉为晕状，叶脉透明，叶片上小支脉出现橘黄色线纹，或叶面布有橘黄色斑点；主脉和侧脉出现紫红色坏死斑（也称枯斑）；叶片皱缩、变厚、变硬、变小，甚至畸形，提早落叶。叶柄上也能发现紫红色或黑色坏死斑点，叶柄基部周围隆起。顶梢或嫩茎皮层常破裂，发病严重植株枝条变形，分枝处产生枯枝，树木明显生长不良。高温时叶部隐症。

发病规律

该病毒有耐高温的特性，致死温度在75-80℃稀释终点10-4，体外存活时间不超过7天（以病毒粗提液在室温下保存）。在杨树体内为系统感染，杨树的所有组织如形成层、韧皮部和木质部等均受侵染，发病后难以防治。

检验及鉴定

1、症状检验
在检疫时应特别注意区分本病毒病与普通花叶病之间的症状差异。二者区别如下：
PMV：叶部症状呈橘黄色线纹或斑点；在麦格隆息丰烟上叶部的症状呈叶脉坏死、系统花叶状；发病盛期在8月底以后。
普通花叶病：叶部症状呈浓淡相间的花叶或斑驳；在麦格隆息丰烟上叶部不表现症状；发病盛期在5月下旬至6月期间。
2、摩擦接种检验
将表现症状的杨树叶片在1％尼古丁水溶液［重量（W）：体积（V）=1：4］中研成糊状，纱布过滤，挤出汁液用来接种。鉴别寄主采用麦格隆息丰烟，用烟草或三生烟也可。用挤出的汁液在事先鉴别寄主叶上撒有500目金钢砂的叶片上摩擦接种，然后用0.005mo1／L磷酸缓冲液冲洗多余的汁液和金钢砂。一般14-21天后在麦格隆息丰烟等接种寄主上表现为叶脉坏死，系统花叶症状；在肛豆上产生系统明脉，沿叶脉扩散，叶片皱缩变小。而非PMV的花叶则不出现上述症状。
3、电镜检验
将病叶以3：4［重量（W）：体积（V）］加入0.5mo1／L磷酸钾液缓冲液（pH7.0），含0.02mo1／L亚硫酸钠，0.005mo1／L的EDTA和0.01mol/L的DIECA在研钵中匀浆，纱布过滤。滤液中加等体积氯仿搅拌15min，然后离心（6000转／min，15min），取出其上清液超离心（30000转／min，2h），沉淀的缓冲液（去掉DIECA）重悬浮后过夜，次日轻悬浮后再离心（6000转／min，15min）。上清液以重悬浮液配制成60％-1O％的线形蔗糖密度梯度，上层放上清液。密度梯度离心（25000转／min，2h）。离心后取病毒带，用2倍体积重悬浮缓冲液稀释，超离心（40000转／min，90min）。采用0.5mol／L磷酸钠缓冲液（含0. 02mol/L亚硫酸钠，0.005mo1／L的EDTA重悬浮缓冲液，pH7.0）将上述超离心的沉淀小球立即重悬浮。将病毒样品放置在附有Formvar膜的铜网上，用2％磷钨酸负染2min，吸去多余染料，晾于，上透射电镜观察病毒粒子。
4、血清学检验
血清学技术根据实验条件可分别选用免疫双扩散、酶联免疫吸附试验（EL1SA）和免疫电镜等，其中以双扩散法最简便实用，EL1SA法灵敏度高，免疫电镜最灵敏直观，不会出现假阳性。
5、病原鉴定
基因组单分子单链RNA，正链，2.7MD。衣壳蛋白分子量32千道尔顿（kD）。病毒粒子线条状，600-1000μm × 10-14μm，核衣壳为螺旋状，无包膜。分为加拿大株系、荷兰株系和德国株系。

检疫处理方法

1、严禁从疫区或疫情发生区调运寄主苗木、插条，进入非病区，发现带有PMV的苗木等繁殖材料要销毁。
2、把好产地检疫关，将防治重点放在育苗阶段，对插条苗要精选种条；对平茬苗和生产苗应严格检查；严禁用病苗育种造林。
3、有条件的苗圃可用组织培养方法进行茎尖脱毒，保证供应无毒苗育种造林。